一例Bw11亚型的鉴定及分子生物学分析

摘要

目的 分析一例Bw11亚型的血清学和分子生物学特征.方法 应用经典试管法、微柱凝胶法和吸收放散法检测ABO抗原和血清中存在的ABO抗体.应用序列特异引物(sequence-specific primer,SSP)引导的聚合酶链反应进行ABO基因分型,进一步测序分析ABO基因第1～7外显子核苷酸序列,对发生变异外显子进行单倍型分析.结果 微柱凝胶法正反定型相符提示为0型;经典试管法正反定型不符;吸收放散实验证实存在B抗原;抗体筛查排除同种抗体存在.SSP基因分型为B/O1;第6、7外显子测序与B101/001基因序列比对存在第7外显子695T＞C变异,导致232位亮氨酸转变为脯氨酸,证实为Bw11/01杂合子.结论 nt695T＞C变异可能是导致B抗原减弱的分子遗传机制.Bw11亚型可能存在较强抗B抗体,人源及部分单克隆试剂不能检测出Bw11亚型易被误判为0型,应用分子生物学方法有助于ABO亚型的准确鉴定.