纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物检测方法的建立和初步临床应用

摘要

目的建立纤溶酶-α2抗纤溶酶复合物(PAP)的检测方法.方法从血浆中纯化PAP作为免疫原制备单克隆抗体(单抗),建立双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),并对该法进行评价.结果获取了特异针对PAP新抗原的单抗LW3C10,和针对PAP及纤溶酶原(Plg)的单抗LW2B9.对PAP的亲和常数分别为4.69×10-10 mol/L、5.62×10-9 mol/L.以它们建立的夹心ELISA检测PAP在0 ～ 150 μg/L范围内线性良好,批内、批间CV分别为4.0 % ～ 5.2 %、11.2 % ～ 13.6 %,回收率为85 % ～ 105 % ,加入α2抗纤溶酶(α2AP)及纤溶酶-α2巨球蛋白复合物(P-α2M)不干扰测定,与美国ADI公司PAP试剂盒相关良好(r=0.962 9).急性髓细胞白血病组、急性心肌梗死组、肝病组、健康老年人组的血浆PAP水平显著高于正常对照组(P<0.001).结论该法可用于评估纤溶系统激活.