应用特异性引物鉴定人申克孢子丝菌感染

摘要

目的 研究人申克孢子丝菌感染的分子生物学鉴定方法,为建立检测人申克孢子丝菌感染的快速、敏感、特异方法提供参考资料.方法 从疑似申克孢子丝菌感染患者的感染部位表面刮取物、腐烂组织或活检组织中提取DNA,应用合成的申克孢子丝菌特异性引物ITS3-SSP进行核糖体DNA内ITS2靶序列PCR扩增,将检测结果与真菌培养鉴定结果或组织病理学检查对比,观察种特异性引物PCR扩增结果的敏感性和特异性.结果 在17例经形态学检查和/或真菌培养检查证实的组织标本中,有12例扩增出191 bp的片段,其中7例组织中发现染成紫红色的圆形或卵圆形的孢子;而在11例经真菌培养证实为申克孢子丝菌的标本中,有4例样品巢式PCR结果为阴性.结论 应用所设计的特异性引物ITS3-SSP结合巢式PCR方法鉴定申克孢子丝菌特异、敏感,是一种非常有发展潜力的检查手段.