多重PCR检测临床分离金黄色葡萄球菌lukS/F-PV和mecA基因

摘要

目的 建立一种新的多重PCR方法,检测临床分离金葡菌的杀白细胞素毒力基因(lukS/F-PV)和甲氧西林耐药基因(mecA).方法 收集我院2006年1-12月从临床多种标本中分离鉴定的不重复金葡菌,应用多重PCR技术,优化反应条件,同时扩增葡萄球菌属特异性基因16S rRNA、金葡菌种特异性基因nuc、lukS/F-PV基因和mecA基因,扩增产物经凝胶成像系统分析.结果 217株金葡菌经多重PCR检测,31株是16S rRNA + nuc + lukS/F-PV + mecA基因型,3株是16S rRNA + nuc + lukS/F-PV基因型,135株是16S rRNA + nuc + mecA基因型,40株是16S rRNA + nuc 基因型,其中5株仅扩增出16S rRNA 基因,3株仅扩增出nuc基因.lukS/F-PV基因和mecA基因测序显示与GenBank中的已有序列具有高度同源性,其阳性率分别为15.7%(34/217)和76.5%(166/217);34株lukS/F-PV基因阳性的分离株中,31株为MRSA,占91.2%(31/34).结论 本方法适用于快速检测和鉴定产杀白细胞素MRSA,lukS/F-PV基因阳性的菌株以MRSA为主,应加强监控.