mecA基因

摘要： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)现已成为医院及社区感染的重要病原菌之一,其传播速度快,致病力强,且流行范围广,而抗生素的滥用导致了MRSA多重耐药日益严重。临床上对于MRSA感染的治疗面临极大压力,因此迫切需要加强对MRSA耐药机制的深入研究,为研发新药和寻求新的治疗策略提供参考。本文就MRSA的流行病学特点及其主要的耐药机制(青霉素结合蛋白、mecA基因及其同源物、fem基因簇、vanA操纵子、SCCmec盒、主动外排系统等)进行综述。

摘要： 目的 建立实时荧光环介导恒温扩增(Rea-LAMP)快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法.方法 针对葡萄球菌的mecA耐药标志性基因和SA特有的femA基因的6个区域设计6条特异性引物,对MRSA、MSSA以及其他菌株等19株标准菌株的全基因组DNA进行Rea-LAMP,评价这些标准菌株的特异性、灵敏度和重复性;根据这些标准菌株的特异性,用Rea-LAMP反应体系检测临床分离的68株金黄色葡萄球菌(SA)菌株,并与VITEK2 Compact全自动微生物分析仪鉴定结果进行比较.结果 本研究体系的引物扩增效果好,无引物二聚体,在19株标准菌株的检测中,除了MRSA和MSSA有相应的反应曲线外,其余菌株均为阴性;本体系的灵敏度可达1μg/L,68株临床SA菌株检测结果与VITEK2 Compact全自动微生物分析仪鉴定结果一致.结论 Rea-LAMP反应体系检测MRSA特异性强、稳定性好、灵敏度高、操作简单快捷,可用于MRSA的快速检测.

摘要： 目的 建立实时荧光环介导恒温扩增(Rea-LAMP)快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法。方法 针对葡萄球菌的mec A耐药标志性基因和SA特有的fem A基因的6个区域设计6条特异性引物,对MRSA、MSSA以及其他菌株等19株标准菌株的全基因组DNA进行Rea-LAMP,评价这些标准菌株的特异性、灵敏度和重复性;根据这些标准菌株的特异性,用Rea-LAMP反应体系检测临床分离的68株金黄色葡萄球菌(SA)菌株,并与VITEK2 Compact全自动微生物分析仪鉴定结果进行比较。结果 本研究体系的引物扩增效果好,无引物二聚体,在19株标准菌株的检测中,除了MRSA和MSSA有相应的反应曲线外,其余菌株均为阴性;本体系的灵敏度可达1μg/L,68株临床SA菌株检测结果与VITEK2 Compact全自动微生物分析仪鉴定结果一致。结论 Rea-LAMP反应体系检测MRSA特异性强、稳定性好、灵敏度高、操作简单快捷,可用于MRSA的快速检测。

摘要： 目的 探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性,并对MRSA进行SCC mec分型.方法 收集50株MRSA菌株,应用PCR技术扩增mec A基因确证MRSA,并对50株MRSA进行分型,使用纸片扩散法(K-B法)和肉汤稀释法(MIC法)进行耐药性分析.结果 mec A基因检出率为96％;SCC mecⅢ型4株,SCC mecⅣ型3株,其余43株为未分型;50株MRSA对苯唑西林和β-内酰胺类药物完全耐药,对大环内酯类药物及克林霉素耐药性高于80％,所有菌株均对万古霉素、达托霉素和利奈唑胺敏感.结论 MRSA尚未出现严重的多重耐药现象,此结果可为临床用药提供参考.

摘要： 目的了解百合固金汤驯化细菌性肺炎主要细菌的耐药基因及抑菌研究。方法将临床获得的16株菌株按照随机数字表法分为四组,对照组给予生理盐水5 mL(0.9%),高浓度组给药5 mL(0.65 g/mL),中浓度组给药5 mL(0.325 g/mL),低浓度给药5 mL(0.1625 g/mL)给药周期三天。观察细菌生长情况,实时荧光PCR比较四组的基因表达情况。结果对照组基因表达水平为1670.05,高浓度组为197.55,中浓度组为655.62,低浓度组1230.82。结论百合固金汤可以有效抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)性肺炎的MecA基因表达。

摘要： 目的 了解百合固金汤驯化细菌性肺炎主要细菌的耐药基因及抑菌研究.方法 将临床获得的16株菌株按照随机数字表法分为四组,对照组给予生理盐水5?mL(0.9％),高浓度组给药5?mL(0.65?g/mL),中浓度组给药5?mL(0.325?g/mL),低浓度给药5?mL(0.1625?g/mL)给药周期三天.观察细菌生长情况,实时荧光PCR比较四组的基因表达情况.结果 对照组基因表达水平为1670.05,高浓度组为197.55,中浓度组为655.62,低浓度组1230.82.结论 百合固金汤可以有效抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)性肺炎的MecA基因表达.

摘要： 目的 构建mecA基因检测的超支化等温扩增PCR检测方法.方法 以常规标本中分离和用VITEK2 Compact全自动细菌鉴定仪鉴定的MRSA和MSSA为研究对象,在mecA基因序列的保守区采用Primer 6.0设计PCR发卡结构引物H1、H2、SH1、SH2构建超支化等温扩增PCR检测体系,并对两种检测方法进行比较.结果 VITEK2 Compact全自动细菌鉴定和超支化等温扩增PCR检测对含mecA基因的MRSA检测结果差异没有统计学意义(P>0.05).结论 成功构建了超支化等温扩增PCR检测方法,简单、快捷实现了含mecA基因的MRSA检测.

摘要： 目的：评价五种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)实验方法的临床应用价值。方法：收集134株金黄色葡萄球菌临床分离株，用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁琼脂稀释法以及显色培养法进行实验检测，同时以PCR检测mecA基因作为对照。结果：134株金葡菌中，mecA基因阳性88株，mecA基因阴性46株。以mecA基因检测结果为标准，苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法的敏感性分别为95.5%和97.7%，特异性均为97.8%；苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100%，特异性分别为97.8%和91.3%；显色培养法敏感性和特异性分别为98.9%和97.8%。5种方法与标准方法相比，均无统计学差异。结论：5种筛查MRSA方法与mecA基因检测结果具有很好的一致性；头孢西丁纸片扩散法操作简便，结果可靠，可作为临床实验室检测MRSA的常规方法。

摘要： 目的：评价五种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)实验方法的临床应用价值。方法：收集134株金黄色葡萄球菌临床分离株，用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁琼脂稀释法以及显色培养法进行实验检测，同时以PCR检测mecA基因作为对照。结果：134株金葡菌中，mecA基因阳性88株，mecA基因阴性46株。以mecA基因检测结果为标准，苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法的敏感性分别为95.5%和97.7%，特异性均为97.8%；苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100%，特异性分别为97.8%和91.3%；显色培养法敏感性和特异性分别为98.9%和97.8%。5种方法与标准方法相比，均无统计学差异。结论：5种筛查MRSA方法与mecA基因检测结果具有很好的一致性；头孢西丁纸片扩散法操作简便，结果可靠，可作为临床实验室检测MRSA的常规方法。

摘要： 目的：评价五种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)实验方法的临床应用价值。方法：收集134株金黄色葡萄球菌临床分离株，用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁琼脂稀释法以及显色培养法进行实验检测，同时以PCR检测mecA基因作为对照。结果：134株金葡菌中，mecA基因阳性88株，mecA基因阴性46株。以mecA基因检测结果为标准，苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法的敏感性分别为95.5%和97.7%，特异性均为97.8%；苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100%，特异性分别为97.8%和91.3%；显色培养法敏感性和特异性分别为98.9%和97.8%。5种方法与标准方法相比，均无统计学差异。结论：5种筛查MRSA方法与mecA基因检测结果具有很好的一致性；头孢西丁纸片扩散法操作简便，结果可靠，可作为临床实验室检测MRSA的常规方法。

摘要： 目的：评价五种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)实验方法的临床应用价值。方法：收集134株金黄色葡萄球菌临床分离株，用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁琼脂稀释法以及显色培养法进行实验检测，同时以PCR检测mecA基因作为对照。结果：134株金葡菌中，mecA基因阳性88株，mecA基因阴性46株。以mecA基因检测结果为标准，苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法的敏感性分别为95.5%和97.7%，特异性均为97.8%；苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100%，特异性分别为97.8%和91.3%；显色培养法敏感性和特异性分别为98.9%和97.8%。5种方法与标准方法相比，均无统计学差异。结论：5种筛查MRSA方法与mecA基因检测结果具有很好的一致性；头孢西丁纸片扩散法操作简便，结果可靠，可作为临床实验室检测MRSA的常规方法。

摘要： 目的：评价五种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)实验方法的临床应用价值。方法：收集134株金黄色葡萄球菌临床分离株，用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁琼脂稀释法以及显色培养法进行实验检测，同时以PCR检测mecA基因作为对照。结果：134株金葡菌中，mecA基因阳性88株，mecA基因阴性46株。以mecA基因检测结果为标准，苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法的敏感性分别为95.5%和97.7%，特异性均为97.8%；苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100%，特异性分别为97.8%和91.3%；显色培养法敏感性和特异性分别为98.9%和97.8%。5种方法与标准方法相比，均无统计学差异。结论：5种筛查MRSA方法与mecA基因检测结果具有很好的一致性；头孢西丁纸片扩散法操作简便，结果可靠，可作为临床实验室检测MRSA的常规方法。

摘要： 目的：评价五种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)实验方法的临床应用价值。方法：收集134株金黄色葡萄球菌临床分离株，用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁琼脂稀释法以及显色培养法进行实验检测，同时以PCR检测mecA基因作为对照。结果：134株金葡菌中，mecA基因阳性88株，mecA基因阴性46株。以mecA基因检测结果为标准，苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法的敏感性分别为95.5%和97.7%，特异性均为97.8%；苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100%，特异性分别为97.8%和91.3%；显色培养法敏感性和特异性分别为98.9%和97.8%。5种方法与标准方法相比，均无统计学差异。结论：5种筛查MRSA方法与mecA基因检测结果具有很好的一致性；头孢西丁纸片扩散法操作简便，结果可靠，可作为临床实验室检测MRSA的常规方法。

摘要： 为了解动物源性耐甲氧西林葡萄球菌的耐药情况,本试验从动物体表及体内分离并鉴定了75株葡萄球菌,通过头孢西丁纸片扩散法筛选出40株耐甲氧西林葡萄球菌,分离率为53.3%.通过对mecA基因的PCR检测.耐甲氧西林葡萄球菌的阳性率为56.O%.采用K-B法对40株耐甲氧西林葡萄球菌进行了9大类12种药物的耐药性检测,结果显示,耐甲氧西林葡萄球菌对万古霉素,头孢唑啉,阿米卡星等少数几种药物较敏感,有55.O%以上的MRS对青霉素G.氨苄青霉素、四环素,红霉紊,克林霉素、氯霉素.诺氟沙星、环丙沙星耐药.试验结果说明,动物源性耐甲氧西林葡萄球菌有较高的分离率并呈现多重耐药.

摘要： 为了解动物源性耐甲氧西林葡萄球菌的耐药情况,本试验从动物体表及体内分离并鉴定了75株葡萄球菌,通过头孢西丁纸片扩散法筛选出40株耐甲氧西林葡萄球菌,分离率为53.3%.通过对mecA基因的PCR检测.耐甲氧西林葡萄球菌的阳性率为56.O%.采用K-B法对40株耐甲氧西林葡萄球菌进行了9大类12种药物的耐药性检测,结果显示,耐甲氧西林葡萄球菌对万古霉素,头孢唑啉,阿米卡星等少数几种药物较敏感,有55.O%以上的MRS对青霉素G.氨苄青霉素、四环素,红霉紊,克林霉素、氯霉素.诺氟沙星、环丙沙星耐药.试验结果说明,动物源性耐甲氧西林葡萄球菌有较高的分离率并呈现多重耐药.

摘要： 为了解动物源性耐甲氧西林葡萄球菌的耐药情况,本试验从动物体表及体内分离并鉴定了75株葡萄球菌,通过头孢西丁纸片扩散法筛选出40株耐甲氧西林葡萄球菌,分离率为53.3%.通过对mecA基因的PCR检测.耐甲氧西林葡萄球菌的阳性率为56.O%.采用K-B法对40株耐甲氧西林葡萄球菌进行了9大类12种药物的耐药性检测,结果显示,耐甲氧西林葡萄球菌对万古霉素,头孢唑啉,阿米卡星等少数几种药物较敏感,有55.O%以上的MRS对青霉素G.氨苄青霉素、四环素,红霉紊,克林霉素、氯霉素.诺氟沙星、环丙沙星耐药.试验结果说明,动物源性耐甲氧西林葡萄球菌有较高的分离率并呈现多重耐药.

摘要： 为了解动物源性耐甲氧西林葡萄球菌的耐药情况,本试验从动物体表及体内分离并鉴定了75株葡萄球菌,通过头孢西丁纸片扩散法筛选出40株耐甲氧西林葡萄球菌,分离率为53.3%.通过对mecA基因的PCR检测.耐甲氧西林葡萄球菌的阳性率为56.O%.采用K-B法对40株耐甲氧西林葡萄球菌进行了9大类12种药物的耐药性检测,结果显示,耐甲氧西林葡萄球菌对万古霉素,头孢唑啉,阿米卡星等少数几种药物较敏感,有55.O%以上的MRS对青霉素G.氨苄青霉素、四环素,红霉紊,克林霉素、氯霉素.诺氟沙星、环丙沙星耐药.试验结果说明,动物源性耐甲氧西林葡萄球菌有较高的分离率并呈现多重耐药.

摘要： 本发明公开了一种免标记荧光检测金黄色葡萄球菌mecA基因的方法及检测试剂盒，属于分析检测领域。本发明是以发夹探针HP结合核酸外切酶Exo III辅助目标信号级联再循环扩增策略。以G‑quadruplex为信号报告分子，可现实免标记检测金黄色葡萄球菌mecA基因，简化了操作，降低了成本。整个检测过程响应迅速，简单、免标记，且灵敏度高，无需专业训练即可掌握操作流程，便于快速推广使用。本发明所述的检测方法和检测试剂盒，对环境或食品中金黄色葡萄球菌的快速检测具有重要意义。

摘要： 本发明提供一种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin？resistant？Staphylococcus？aureus,MRSA)中耐药基因mecA的引物和探针。本发明还提供了检测MRSA中耐药基因mecA方法和检测试剂盒。本发明采用直接检测耐药基因mecA的保守序列部分，不受菌株mecA基因变异的影响，结果为MRSA诊断的金标准。本发明所提供的特异性引物和探针适用于目前已知包含序列变异的菌株。

摘要： 本发明提供包含序列号3和序列号7的组合、序列号2和序列号9的组合、序列号1和序列号8的组合、序列号1和序列号9的组合、序列号4和序列号11的组合、序列号5和序列号12的组合、序列号6和序列号10的组合或序列号6和序列号12的组合的引物对作为用于实现灵敏度高的甲氧西林耐药性基因检测的甲氧西林耐药性基因检测用引物。

摘要： 本发明提供一种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因的电化学方法。采用双标记和等温循环链置换聚合反应(ISDPR)扩增技术，得到高灵敏、高选择性的mecA基因电化学生物传感器：通过在金电极上逐步修饰纳米金、5′端修饰Fc的发夹DNA和6‑巯基‑1‑乙醇(MCH)，并在含有不同浓度的mecA基因和3′端修饰MB的引物及聚合酶等混合液中进行孵育，将上述修饰好的金电极作为工作电极的三电极体系，采用试差脉冲伏安法，得到Fc和MB的特征响应电流值与mecA基因浓度的对数具有良好的线性关系的标准曲线。该方法操作简便，检测成本低，灵敏度高，实现了对mecA基因的直接检测。

摘要： 本发明公开同时检测耐药性金黄色葡萄球菌MecA和ErmA耐药基因的引物探针，涉及耐药基因检测技术领域，本发明还公开包含引物探针的试剂盒、多重荧光RPA检测方法。本发明的有益效果在于：采用本发明中引物探针的多重荧光RPA检测方法具有很强的特异性、较好的抗干扰性和较高的敏感性。

摘要： 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种基于耐药基因MecA检测耐甲氧西林葡萄球菌的方法。所述耐甲氧西林葡萄球菌的检测方法，包括：S1：设计引物与探针；S2：抽提标本中的基因组DNA；S3：实时荧光PCR进行检测；所述引物包括上游引物和下游引物，核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。本发明建立的一种新的有效检测MRS的荧光PCR法，具有较高的敏感性、特异性和重复性，且该方法具有经济性，能够实现临床对MRS检测的精准需求。

摘要： 本发明公开了金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因mecA检测试剂盒及其应用。该试剂盒通过将采集的样本经细胞裂解液裂解后释放病原体核酸，然后在逆转录酶和7RNA聚合酶的作用下，经过逆转录和转录过程，实现病原体核酸片段的扩增。扩增后的RNA产物被检测液中的特异探针识别捕获，形成RNA扩增产物‑‑‑特异探针‑‑‑金探针复合物，该复合物通过侧向流层析在NC膜上被固定形成可见的条带，实现病原体核酸的检测。本发明没有RNA的提取过程，不需要特殊仪器，基于RNA恒温扩增，在实际检测中不易污染，灵敏度高、特异性强以及操作简单，使金黄色葡萄球菌及耐药基因mecA核酸检测得到广泛应用成为一种可能。

摘要： 本发明公开了一种免标记荧光检测金黄色葡萄球菌mecA基因的方法及检测试剂盒，属于分析检测领域。本发明是以发夹探针HP结合核酸外切酶Exo III辅助目标信号级联再循环扩增策略。以G‑quadruplex为信号报告分子，可现实免标记检测金黄色葡萄球菌mecA基因，简化了操作，降低了成本。整个检测过程响应迅速，简单、免标记，且灵敏度高，无需专业训练即可掌握操作流程，便于快速推广使用。本发明所述的检测方法和检测试剂盒，对环境或食品中金黄色葡萄球菌的快速检测具有重要意义。

摘要： 一种重症感染患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因检测用引物组；还涉及利用上述引物组检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法；还涉及利用上述引物组检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的快速定量检测试剂盒。本发明确立了针对mecA基因甲氧西林抗性的金黄色葡萄球菌测定最佳引物序列及最佳检测方法，建立实验室快速便捷的LAMP高通量检测方法。

摘要： 本发明提供一种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillinresistantStaphylococcusaureus,MRSA)中耐药基因mecA的引物和探针。本发明还提供了检测MRSA中耐药基因mecA方法和检测试剂盒。本发明采用直接检测耐药基因mecA的保守序列部分，不受菌株mecA基因变异的影响，结果为MRSA诊断的金标准。本发明所提供的特异性引物和探针适用于目前已知包含序列变异的菌株。