LncRNA CCAT1通过MAPK/ERK通路影响子宫内膜癌细胞的侵袭转移

摘要

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞侵袭迁移和丝裂原活化激酶/胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路影响,阐明CCAT1在子宫内膜癌侵袭迁移中的作用及可能机制.方法:将KLE细胞分为空白对照组(BC组)、阴性对照组(NC组)、CCAT1-siRNA组和CCAT1-siRNA+EGF组,CCAT1-siRNA组转染 CCAT1-siRNA,CCAT1-siR-NA+EGF组转染CCAT1-siRNA并加入30 ng/ml EGF处理,NC组转染阴性对照siRNA,BC组不转染.实时荧光RT-PCR测定细胞中CCAT1水平,采用Transwell测定KLE细胞侵袭能力,采用划痕实验测定KLE细胞迁移能力,采用Western blot测定各组KLE细胞上皮钙黏蛋白(E-cadhrein)、波纹蛋白(Vimentin)、锌指蛋白转录因子(Snail)、扭曲蛋白(Twist)、ERK和磷酸化ERK(p-ERK)蛋白水平.结果:KLE细胞中CCAT1水平(1.83±0.17)高于T-HESC细胞(1.00±0.09)(t=11.416,PP＜0.001).与BC组(1.00±0.11)和NC组(0.98±0.09)比较,CCAT1-siRNA组KLE细胞中CCAT1水平(0.37±0.08)降低(F=101.237,P＜0.001).与BC组和NC组比较,CCAT1-siRNA组KLE细胞侵袭细胞数降低(P＜0.05),细胞迁移距离降低(P＜0.05),E-cadhrein蛋白水平升高(P＜0.05),Vimentin、Snail、Twist和p-ERK蛋白水平降低(P＜0.05).与CCAT1-siRNA组比较,CCAT1-siRNA+EGF组KLE细胞侵袭细胞数升高(P＜0.05),细胞迁移距离升高(P＜0.05),E-cadhrein蛋白水平降低(P＜0.05),Vimentin、Snail、Twist和p-ERK蛋白水平升高(P＜0.05),BC组和NC组KLE细胞各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论:沉默CCAT1可抑制子宫内膜癌细胞侵袭和迁移,其机制可能与沉默CCAT1可抑制MAPK/ERK信号通路有关.