SIRT1减轻缺氧复氧肾小管上皮细胞炎性损伤的实验研究

摘要

目的:研究沉默信息调节因子1(SIRT1)对缺氧复氧肾小管上皮细胞炎性损伤的影响.方法:构建缺氧复氧肾小管上皮细胞损伤模型,用qRT-PCR和Western blot方法检测细胞中SIRT1的表达变化.在肾小管上皮细胞中转染pcDNA3.1-SIRT1,qRT-PCR和Western blot检测过表达效率.ELISA法检测细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平.Western blot检测CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、Caspase-11蛋白水平.全自动生化分析仪检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量.结果:缺氧复氧肾小管上皮细胞中SIRT1 mRNA和蛋白水平均降低.pcDNA3.1-SIRT1转染后的肾小管上皮细胞中SIRT1 mRNA和蛋白水平均明显升高.缺氧复氧肾小管上皮细胞分泌的TNF-α、IL-1β 水平升高,细胞中CHOP、Caspase-11蛋白水平升高,细胞培养液中LDH水平升高.过表达SIRT1的肾小管上皮细胞经缺氧复氧处理以后,细胞分泌的TNF-α、IL-1β 水平降低,细胞中CHOP、Caspase-11蛋白水平降低,细胞培养液中LDH水平降低.结论:SIRT1具有减轻缺氧复氧肾小管上皮细胞炎性损伤的作用,其可减少细胞分泌炎性因子,作用机制与内质网应激介导的Caspase-11途径有关.