腺病毒载体介导gfp基因在树突细胞的转导及其影响因素的分析

摘要

目的:研究腺病毒载体介导外源基因在人树突细胞转染的有效方法.方法:绿色荧光蛋白(gfp)报告基因重组腺病毒的构建采用直接连接法.人树突细胞的制备通过分离人外周血单核细胞,然后在体外经过诱导过程再生.结果:经腺病毒介导实现了gfp基因在树突细胞的转导和表达.病毒滴度对转导效率影响较大,只有使用高滴度(MOI＞100)的重组腺病毒才能获得较高的转导效率(40%以上);脂质体和多聚赖氨酸可以明显提高转导效率(提高50%左右),转导效率最高可达65%左右.结论:由腺病毒介导进行树突细胞的转基因需要较高的病毒滴度;脂质体和多聚赖氨酸可以提高基因的转导效率.