创伤弧菌溶细胞素噬菌体单链抗体库的构建

摘要

目的为获得高特异性创伤弧菌溶细胞素单链抗体,利用噬菌体展示技术建立鼠源性噬菌体单链抗体库。方法用溶细胞素蛋白免疫BALB/c小鼠后,取脾脏提取总RNA,逆转录获得cDNA。以cDNA为模板扩增出抗体的轻链和重链可变区基因片段,通过OE-PCR技术拼接成完整scFv基因片段,构建重组噬菌粒pComb3XSS-scFv,电转化到大肠杆菌XL1-Blue构建噬菌体单链抗体库。结果构建鼠源性的噬菌体单链抗体文库其重组率为78%,库容量为3×10^(8)。结论成功构建鼠源单链抗体噬菌体文库,为创伤弧菌感染的快速诊断奠定基础。