橙皮苷对TGF-β1诱导的A549非小细胞肺癌细胞上皮间质转化的影响

摘要

目的:探讨橙皮苷对转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）诱导的人非小细胞肺癌细胞上皮-间质转化的影响。方法:以A549人非小细胞肺癌细胞系作为研究对象。用MTT法,分别检测橙皮苷对正常培养条件或TGF-β1刺激下细胞增殖的影响。应用2种方法评估橙皮苷对TGF-β1刺激条件下A549细胞的上皮间质转化:圆形度值定量评估细胞的形态变化;双抗体夹心酶联免疫吸附法（enzyme linked-immuno-sorbent assay,ELISA）检测上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin,E-cad）、ɑ-平滑肌肌动蛋白（ɑ-smooth muscle actin,ɑ-SMA）、基质金属蛋白酶抑制因子-1（tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1）和基质金属蛋白酶-9（metallopreoteinases-9,MMP-9）水平。结果:0~40μmol·L-1的橙皮苷对正常培养条件或TGF-β1刺激后A549细胞的增殖没有显著影响。5 ng·mL-1 TGF-β1能够诱导A549细胞的上皮间质转化:由上皮特征的铺路石状的细胞形态转化为梭形形态,圆形度值减少;E-cad分泌量减少和ɑ-SMA合成量增加。另外,MMP-9分泌量增加,MMP-9/TIMP-1比值增加。在细胞出现形态改变后,应用橙皮苷（20μmol·L-1或40μmol·L-1）能够降低ɑ-SMA、MMP-9水平和MMP-9/TIMP-1比值,增加E-cad水平,对细胞的圆形度值没有影响。结论:橙皮苷减轻TGF-β1诱导的非小细胞肺癌细胞的上皮间质转化程度,对非小细胞肺癌的转移和扩散有一定的抑制作用。