促红细胞生成素对神经干细胞缺氧性损伤保护作用的实验研究

摘要

目的 观察外源性EPO对神经干细胞缺氧性损伤的保护作用,为缺氧缺血性脑损伤的治疗提供新思路.方法 从孕11.5d(E11.5d)大鼠获得神经干细胞,经无血清培养基悬浮培养并传代,对所获细胞的自我增殖、自我更新及其多分化潜能进行检测.取传3代神经干细胞中添加不同剂量的EPO,在5%O2培养箱中培养120h.通过计数干细胞克隆形成率和MTT法检测神经干细胞的增殖情况.于含血清分化培养基中加入不同剂量的EPO,用NSE和GFAP免疫细胞化学染色观察神经干细胞的分化情况.采用Annexin Ⅴ-FITC/PI染色,激光扫描共聚焦显微镜观察、检测细胞凋亡率.结果 加入EPO后神经干细胞的克隆形成率和MTT检测的OD值显著增高,细胞凋亡率显著下降,NSE阳性细胞的比例明显升高,其作用随剂量增加而增大,50U/ml时作用最大.结论 EPO对神经干细胞缺氧性损伤具有明显的保护作用,并可促进神经干细胞向神经元方向分化.EPO的这种作用随剂量增加而增大,50U/ml时达高峰.