U1小核核糖核酸嵌合体核酶细胞内抑制丙型肝炎病毒表达的研究

摘要

目的观察以U1小核核糖核酸为靶向基因构建的嵌合体核酶在细胞内抑制丙型肝炎病毒(HCV)表达的作用.方法通过聚合酶链反应及克隆连接反应,将针对HCV核心区的特异性核酶序列代替了U1小核RNA的部分区域,构建出嵌合体核酶的真核表达载体;将其与带有荧光素酶报告基因的靶基因共转染Huh7细胞系,通过Western blot及发光检测仪来判定抑制效率并与相同序列核酶的效率进行比较.结果 U1-嵌合体核酶构建成功;共转染结果显示核酶及嵌合体核酶对HCV表达均有抑制作用,但以嵌合体核酶的效率为高.结论以U1小核核糖核酸作为核酶载体可以增加核酶在细胞内的切割活性.