胰岛素对人肝细胞L02水通道蛋白9表达的影响及其调控通路

摘要

目的探讨胰岛素对人肝细胞株L02细胞膜上水通道蛋白9（AQP9）表达的调控及其调控通路。方法体外培养正常人肝细胞L02,分别给予磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂LY294002、丝/苏氨酸激酶（AKT）抑制剂A-443654、丝裂酶原激活蛋白激酶（MAPK）抑制剂SB2030580及不同浓度胰岛素干预,逆转录聚合酶链反应及Western blot检测肝细胞AQP9的mRNA和蛋白质表达。组间数据比较采用单因素方差分析。结果从胰岛素100 nmol/L开始,AQP9的mRNA和蛋白质表达降低（分别为0.55±0.08和0.59±0.08）,胰岛素浓度为500 nmol/L时降低最明显（分别为0.39±0.05和0.40±0.06）,与对照组相比,差异有统计学意义（P值均＜0.05）。从胰岛素作用后3 h开始,AQP9转录逐渐降低,12 h时抑制作用明显,AQP9的mRNA和蛋白质相对表达量分别为0.53±0.08和0.54±0.08（P值均＜0.05）。PI3K抑制剂LY294002及AKT抑制剂A443654能有效阻断胰岛素对AQP9表达的影响;而MAPK抑制剂SB2030580则对胰岛素刺激AQP9表达无明显作用。结论人正常肝细胞膜上AQP9的表达受胰岛素调控,且与PI3K-AKT通道相关。