2-甲氧基雌二醇诱导骨髓瘤细胞分化的分子机制研究

摘要

目的研究2-甲氧基雌二醇(2ME2)诱导骨髓瘤细胞系分化的分子机制.方法应用细胞形态学方法、流式细胞术分析、ELISA法和RT-PCR方法,观察2ME2对于骨髓瘤细胞系LP-1、CZ-1、NCI-H929细胞分化的影响,同时检测细胞分化时X盒结合蛋白1(XBP-1)mRNA的改变情况.继而采用XBP-1、Blimp-1、pax-5硫代反义寡核苷酸(ASODN)作为干预手段,观察其对于2ME2诱导骨髓瘤细胞系分化作用的影响及mRNA水平的变化.结果2ME2可诱导骨髓瘤细胞系LP-1、CZ-1、NCI-H929细胞向成熟阶段分化,伴随着细胞分化的过程XBP-1 mRNA的表达水平上调.XBP-1 ASODN和Blimp-1 ASODN可以部分抑制2ME2促骨髓瘤细胞系分化作用,而pax-5 ASODN可以加强2ME2促骨髓瘤细胞系分化作用.经pax-5 ASODN作用72 h,经形态学观察,细胞向成熟阶段分化,表现为细胞胞核缩小,胞浆丰富,核浆比例下降,核仁减少或消失,核染色质变粗、变密;细胞表面标志CD49e表达率增高;同时细胞分泌轻链蛋白升高.经Blimp-1 ASODN作用72 h后,pax-5 mRNA水平显著升高;而XBP-1 mRNA水平下降.结论2ME2可诱导骨髓瘤细胞系LP-1、CZ-1、NCI-H929细胞向成熟阶段分化,伴随着细胞的分化XBP-1 mRNA的表达水平上调.Blimp-1可通过抑制pax-5 mRNA的表达上调XBP-1 mRNA的表达水平,促进骨髓瘤细胞分化.