瑞芬太尼通过调控miR-212-3p/LIN28B表达影响子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭

摘要

目的 探讨瑞芬太尼对子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法 不同浓度(0、5、50、500 ng/ml)的瑞芬太尼干预子宫内膜癌Ishikawa细胞24 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制率,Transwell法检测细胞迁移和侵袭,Western印迹检测细胞中细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和LIN28B蛋白表达,qRT-PCR检测Ishikawa细胞中miR-212-3p和LIN28BmRNA表达.分别转染miR-NC、miR-212-3p mimics、si-NC、si-LIN28B至Ishikawa细胞,用不含瑞芬太尼的培养基干预24 h后,上述相同方法检测细胞增殖、迁移和侵袭及相关蛋白表达.转染anti-miR-NC、anti-miR-212-3p至Ishikawa细胞,并用含500 ng/ml瑞芬太尼的培养基干预24 h,上述相同方法检测细胞增殖、迁移和侵袭及相关蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证miR-212-3p与LIN28B的靶向调控关系.结果 瑞芬太尼可剂量依赖性提高Ishikawa细胞增殖抑制率及细胞中p21蛋白表达(P<0.05),而降低细胞迁移数、侵袭数及CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达.同时,瑞芬太尼促进Ishikawa细胞中miR-212-3p的表达(P<0.05),而抑制LIN28B表达(P<0.05).过表达miR-212-3p或抑制LIN28B表达均提高Ishikawa细胞增殖抑制率及细胞中p21蛋白表达(P<0.05),而降低细胞迁移数、侵袭数及CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达(P<0.05).miR-212-3p在Ishikawa细胞中负向调控LIN28B表达,抑制miR-212-3p表达逆转了瑞芬太尼对Ishikawa细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结论 瑞芬太尼可抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、迁移和侵袭,其可能通过调控miR-212-3p/LIN28B轴发挥作用.