白花丹素通过调控miR-218-5p/CNTN1表达对子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制

摘要

目的 探讨白花丹素通过调控微小RNA-218-5p(miR-218-5p)/接触蛋白(CNTN)1表达对子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制.方法 噻唑蓝(MTT)法检测1.0、2.5、5.0μmol/L白花丹素对子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖的抑制作用;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力.实时荧光定量-聚合酶链式反应(qRT-PCR)与Western印迹方法检测白花丹素对HEC-1A细胞miR-218-5p及CNTN1的表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-218-5p与CNTN1的作用关系.分别将miR-218-5p mimic、miR-NC、si-CNTN1、si-NC转染入HEC-1A细胞,继而在HEC-1A细胞转染anti-miR-218-5p后用白花丹素处理.采用MTT、Transwell实验检测细胞增殖、迁移及侵袭能力变化.Western印迹检测CyclinD1、MMP-2、MMP-9、p21蛋白表达.结果 白花丹素作用子宫内膜癌HEC-1A细胞后可明显降低细胞增殖、迁移及侵袭能力(P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低(P<0.05),而p21蛋白表达水平明显升高(P<0.05),且随着作用浓度的增加其作用效果越显著;白花丹素可明显上调miR-218-5p表达而下调CNTN1表达,且呈剂量依赖效应;双荧光素酶报告基因实验验证CNTN1是miR-218-5p的靶基因;miR-218-5p过表达或沉默CNTN1表达能够显著抑制HEC-1A细胞增殖、迁移及侵袭;抑制miR-218-5p表达能够显著减弱白花丹素对HEC-1A细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用.结论 白花丹素可通过调控miR-218-5p/CNTN1表达进而抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移及侵袭.