LncRNA ZBTB20-AS1靶向miR-132-3 p/MAPT轴影响阿尔茨海默病的发生发展

摘要

目的 探讨长链非编码(Lnc)RNA锌指蛋白ZBTB20反义RNA1(ZBTB20-AS1)靶向miR-132-3p/微管相关蛋白tau(MAPT)轴对阿尔茨海默病(AD)发生发展的影响.方法 采用Aβ25～35(20μmol/L)处理SK-N-SH细胞构建AD细胞模型.将si-con、si-ZBTB20-AS1、miR-con、miR-132-3p mimics、si-MAPT分别转染SK-N-SH细胞,经Aβ25～35处理后,反转录及荧光定量PCR(RT-qPCR)检测ZBTB20-AS1和miR-132-3p的表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测MAPT、细胞周期蛋白(Cyclin)D1和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase)-3的表达水平.双荧光素酶报告基因实验验证ZBTB20-AS1和miR-132-3p、miR-132-3p和MAPT的靶向关系.结果 AD细胞模型中ZBTB20-AS1和miR-132-3p的表达水平显著升高,MAPT的表达水平显著降低.沉默ZBTB20-AS1、过表达miR-132-3p或沉默MAPT均可促进SK-N-SH细胞增殖,抑制Aβ25～35诱导的细胞凋亡.miR-132-3p是ZBTB20-AS1的靶基因,ZBTB20-AS1可靶向负性调控miR-132-3p表达.MAPT是miR-132-3p的靶基因,miR-132-3p可靶向调控MAPT表达.抑制miR-132-3p表达或过表达MAPT均可逆转沉默ZBTB20-AS1对Aβ25～35诱导的SK-N-SH细胞增殖和凋亡的影响.结论 沉默ZBTB20-AS1通过调控miR-132-3p/MAPT轴可促进SK-N-SH细胞增殖,抑制Aβ25～35诱导的SK-N-SH细胞凋亡.