基于PI3K/AKT信号通路研究丹酚酸B对成骨细胞骨形成的调控作用

摘要

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3 K/AKT)信号通路在丹酚酸B对成骨细胞骨形成的调控作用.方法 0.00、0.01、0.03、0.10、0.30、1.00 nmol/L的丹酚酸B作用MC3T3-E1细胞12、24、36 h,MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)、Ⅰ型胶原蛋白(COL Ⅰ)、骨钙素(OCN) mRNA表达,Western印迹检测细胞中ALP、OPN、COL Ⅰ、OCN及PI3 K/AKT信号通路相关蛋白的表达.结果 与0.00 nmol/L比较,0.03、0.10、0.30 nmol/L丹酚酸B组细胞活力显著提高(P＜0.01),ALP、OPN、COL Ⅰ、OCN蛋白及mRNA表达量上调(P＜0.01),PI3K及p-AKT表达量上调(P＜0.01);而LY294002组ALP、OPN、COLⅠ及OCN蛋白及mRNA表达量下调(P＜0.01),PI3K及p-AKT表达量下调(P＜0.01).与LY294002组比较,丹酚酸B+ LY294002组ALP、OPN、COLⅠ、OCN蛋白及mRNA表达量上调(P＜0.01),PI3K及p-AKT表达量上调(P＜0.01).结论 丹酚酸B通过激活PI3K/AKT信号通路促进MC3T3-E1细胞骨形成.