何首乌单体成分对肝组织及细胞损伤的研究

摘要

目的 探究何首乌三种单体成分二苯乙烯苷,大黄素,儿茶素等对肝组织及细胞损伤的情况. 方法 利用48只老鼠随机分为二苯乙烯苷组、大黄素组、儿茶素组、对照组,每组12只,二苯乙烯苷组、大黄素组、儿茶素组按照剂量1 g/kg,对照组给予相应量生理盐水,对大鼠连续灌胃28 d.给药过程中,观察大鼠一般状态.末次给药结束后,检测血清肝功能相关生化指标、HE染色观察肝组织病理形态学变化、Western blot检测肝组织凋亡相关蛋白表达.利用人正常肝细胞系LO2细胞,如动物实验一般分为四组.二苯乙烯苷组、大黄素组、儿茶素组分别采用7个不同浓度培养24 h及48 h,对照组加入生理盐水培养同样时间.利用CCK8观察细胞增殖情况,利用PCR检测凋亡相关因子mRNA表达情况. 结果 喂养28 d后,与对照组比较,二苯乙烯苷组、大黄素组、儿茶素组三组大鼠体重、摄食量、均无显著差异(P＞0.05),大黄素组、儿茶素组大鼠肝组织可见病理性肝损伤现象,肝脏生化指标异常(P＜0.05),且凋亡蛋白表达显著增高[Bcl-2:0.450±0.040比0.340±0.030、0.410±0.070,P＜0.05;Caspase-3:0.030±0.000比0.760±0.030、0.270±0.060, P＜0.01;Bax:0.020±0.001比0.440±0.030、0.150±0.040,P＜0.01.];二苯乙烯苷组大鼠肝组织表现正常.正常肝细胞经过处理后,与对照组比较,大黄素组、儿茶素组显示二种单体成分呈浓度依赖性、时间依赖性抑制LO2正常肝细胞增殖(P＜0.05),且肝细胞凋亡因子mRNA表达显著升高[Bax:0.89±0.12比1.74±0.05、1.29±0.01,P＜0.01;Caspase-3:0.97±0.07比1.21±0.07、1.25±0.01,P＜0.01;Bcl-2:1.39±0.18比0.06±0.06、0.56±0.11,P＜0.01.];二苯乙烯苷组细胞与对照组相比,生存率无显著差异(P＞0.05),肝细胞凋亡因子mRNA表达显著降低(P＜0.05). 结论 何首乌的二苯乙烯苷成分未见明显肝损伤,大黄素、儿茶素在体内外实验中均显示出肝组织及肝细胞损伤.