高迁移率族蛋白A2加重脂多糖诱导的内皮细胞损伤

摘要

目的研究高迁移率族蛋白A2(HMGA2)在脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤中的作用及其机制。方法探究脂多糖刺激下HMGA2表达变化,将细胞分为2组,空白模型组,空白对照组。探究HMGA2过表达对内皮细胞损伤的影响,将细胞分为4组,对照组,HMGA2组,模型组,实验组。采用脂多糖(100 ng/ml)刺激12 h诱导HUVEC损伤。采用Western blot检测蛋白表达以及筛选可能的信号通路;采用PCR检测炎性细胞因子的转录水平;TNUEL染色检测细胞凋亡;荧光探针二乙酰二氯氢化荧光素检测细胞活性氧水平;硝酸酶还原法检测细胞内NO水平。结果Western blot检测结果显示,与空白对照组比较,空白模型组HMGA2表达明显增高,差异有统计学意义(0.40±0.03 vs 0.14±0.01,P<0.05)。与模型组比较,实验组白细胞介素1、白细胞介素6和TNF-αmRNA表达明显上调;凋亡阳性细胞数目增多;活性氧荧光强度增强;NO水平明显升高;磷酸化IκB、磷酸化p65和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脂多糖刺激可以诱导HUVEC的HMGA2表达上调,并且HMGA2通过激活NF-κB/iNOS/NO信号通路促进内皮细胞损伤。