腺病毒载体介入的人β2—肾上腺素能受体基因导入心肌细胞的研究

摘要

目的：观察重组缺陷型腺病毒即腺病毒载体介导的人β2肾上腺素受体（β2－AR）基因导入大鼠心肌细胞后β2－AR的表达及其功能，方法：构建含人β2－AR基因的腺病毒载体（Adβ2－AR），转梁大鼠的心肌细胞，检测心肌细胞对人β2－AR的表达及环磷酸腺苷（cAMP)的含量。结果：Northern印迹杂交显示Adβ2－AR转染的心肌表达人β2－ARmRNA;Western免疫印迹杂交分析表明转染的心肌细胞有人β2－AR；放射性配基检测显示转基因心肌细胞的β－AR密度[（234±6．4）fmol/mg蛋白]是未转染的心肌细胞密度[(76±2．8）fmol/mg蛋白]的3倍（P＜0．01）；经10μmol/L异丙肾上腺素作用，转基因的心肌细胞的cAMP量[（124±6．8）pmol/106细胞]明显高于对照组[（58．4±4．6）pmol/106细胞]（P＜0．01）。结论人β2－AR基因经腺病毒载体导入心肌细胞后能有效地表达并有激活肾上腺素信号的作用。