高效表达利什曼原虫PEPCK的人复制缺陷型重组腺病毒载体

摘要

本发明属于生物技术领域，针对目前利什曼病的现状公开了一种高效表达利什曼原虫磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(PEPCK)的人复制缺陷型重组腺病毒载体。具体为将修饰后的PEPCK基因与pShuttle‑CMV载体构建的重组载体pShuttle‑CMV‑Leish‑PEPCK和pAdEasy‑1载体进行同源重组，得到的质粒载体pAd5‑L.m‑PEPCK经过PacI切割，转染进人胚肾细胞293而获得复制缺陷型重组腺病毒载体Ad5‑L.m‑PEPCK。经考马斯亮蓝R250染色和特异抗体抗His标签抗体的Western blot分析表明重组腺病毒载体Ad5‑L.m‑PEPCK能够高效表达PEPCK蛋白。由于利什曼原虫磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶(PEPCK)是最近发现的最有免疫优势的利什曼病抗原。因此本发明重组腺病毒载体Ad5‑L.m‑PEPCK可用于利什曼病的疫苗，从而有助于利什曼病的防控。