LncRNA FEZF1-AS1靶向miR-1254调控肝癌细胞的生物学行为

摘要

背景:肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,严重威胁人们生命健康.目前,越来越多研究证实长链非编码RNA(LncRNA)在癌症发生、进展中的作用.目的:探讨LncRNA FEZF1-AS1靶向miR-1254调控肝癌细胞生物学行为的分子机制.方法:采用qRT-PCR法检测肝癌组织和细胞株中FEZF1-AS1和miR-1254表达.将肝癌Hep3B细胞分为NC组、si-Lnc FEZF1-AS1组、si-con组、miR-1254组、miR-con组、si-Lnc FEZF1-AS1+anti-miR-con组、si-Lnc FEZF1-AS1+anti-miR-1254组.MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双萤光素酶报告基因实验验证FEZF1-AS1与miR-1254的靶向调控关系,蛋白质印迹法检测相关蛋白的表达.结果:肝癌组织和3种肝癌细胞株中FEZF1-AS1表达显著高于相应癌旁组织和正常细胞,miR-1254表达显著降低.转染si-Lnc FEZF1-AS1或miR-1254 mimics均可显著抑制Hep3B细胞Ki-67、N-cadherin和Vimentin表达,促进cleaved caspase-3和E-cadherin蛋白表达,抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力,抑制EMT发生,促进细胞凋亡.FEZF1-AS1靶向负调控miR-1254表达.转染si-Lnc FEZF1-AS1可抑制PI3K/AKT信号通路活化.转染anti-miR-1254可逆转转染si-Lnc FEZF1-AS1对Hep3B细胞增殖、迁移、侵袭、EMT、凋亡以及PI3K/AKT信号通路的影响.结论:LncRNA FEZF1-AS1在肝癌患者中的表达上调.沉默LncRNA FEZF1-AS1通过靶向miR-1254抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭以及EMT发生,促进细胞凋亡,其机制与抑制PI3K/AKT信号通路活化有关.