内质网应激对肝细胞过氧化物酶体增殖物激活受体 α表达的影响

摘要

目的 探讨不同严重程度内质网应激对过氧化物酶体增殖物激活受体 α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARα)表达的影响.方法 以小鼠肝细胞AML-12为研究对象,内质网应激诱导剂衣霉素(Tunicamycin,TM)以时间梯度、浓度梯度细胞诱导不同严重程度的内质网应激.采用实时荧光定量PCR方法和免疫印迹方法检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)、PPARα在内质网应激过程中的基因和蛋白动态表达;用免疫荧光染色方法检测PPARα蛋白在内质网应激过程中的表达情况和位置变化.结果 在TM分别以不同时间和不同浓度诱导AML-12细胞内质网应激的过程中,随TM刺激时间延长与浓度增加,CHOP、GRP78 mRNA和蛋白水平也逐渐升高;而PPARαmRNA和蛋白呈现先升高后下降的表达趋势.在免疫荧光检测中,TM刺激早期PPARα 主要在细胞质中表达,晚期集中在细胞核内;低浓度TM刺激时PPARα的位置主要表达在细胞质,而高浓度TM刺激后,PPARα 聚集在细胞核中.结论 细胞轻度内质网应激时,PPARα表达升高,而在细胞严重内质网应激时PPARα表达下降.