动脉粥样硬化患者CD4+CD25+调节性T细胞上Kv1.3通道的活性变化

摘要

目的 探讨动脉粥样硬化性心血管疾病(ACVD)患者CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)的Kv1.3通道活性与该疾病的关系,并验证依普利酮(EPL)对动脉血管粥样硬化有逆转作用.方法 收集ACVD患者(n=70)及正常人志愿者(n=20)全血样本.免疫磁珠分选外周血CD4+CD25+Tregs,CCK-8技术检测ELP对CD4+CD25+Tregs增殖抑制的影响.分组进行培养:正常人外周血的Control组、ACVD患者外周血组(ACVD组)、ACVD患者+EPL组(ACVD+EPL组).RT-qPCR检测各组培养体系中的Kv1.3(钾通道)、KCa3.1(钙通道)和内质网钙释放激活的钙通道(CRAC)基因的表达;In-cell western blotting技术检测CD4+CD25+Tregs的Kv1.3通道蛋白质水平的表达.结果 EPL的最适浓度为30μmol;ACVD组Kv1.3通道的mR-NA和蛋白质的表达分别是正常对照组3.35倍和1.83倍(P<0.01),ACVD+EPL组Kv1.3通道的mRNA和蛋白质的相对表达分别是ACVD组62.09％(P<0.01);ACVD组KCa 3.1和CRAC通道mRNA的表达分别是正常对照组的2.18、2.22倍(P<0.01),ACVD+EPL组KCa 3.1和CRAC通道mRNA的表达是ACVD组的61.01％、76.68％(P<0.01).结论 CD4+CD25+Treg细胞的三种离子通道在ACVD中均有高表达,EPL可抑制Kv1.3通道的活性,推测醛固酮受体拮抗剂可能通过抑制CD4+CD25+Tregs上的Kv1.3通道的激活,抑制了T淋巴细胞的活性,以抑制动脉粥样硬化病变中炎症作用的发生发展.