卵泡抑素样蛋白1在维持结肠癌细胞生长和凋亡中的作用

摘要

目的 观察卵泡抑素样蛋白1（FSTL1）在结肠癌细胞生长和凋亡中的作用。方法 将FSTL1小干扰RNA（siRNA）瞬时转染体外结肠癌DLD1细胞后,细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞活力；克隆形成实验观察单个DLD1细胞形成细胞克隆的能力；流式细胞术检测细胞周期和凋亡；蛋白质印迹法（Western blot）试验检测细胞周期相关蛋白（Cyclin E、E2F-1、p-Rb、p53和p73）、细胞凋亡相关蛋白[Cytochrome C、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）]和细胞通路蛋白[磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（p-ERK1/2）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）和κB抑制蛋白（IκB）]的表达。结果 空白对照（BC）组、siRNA阴性对照（NC）组和FSTL1 siRNA组细胞吸光度A值分别为1.124±0.157、1.243±0.161和0.708±0.114,组间差异有统计学意义（F＝11.172,P＆0.01）；DLD1细胞经转染FSTL1 siRNA后,细胞克隆形成数目为（42.3±6.5）,与BC组（154.7±16.2）或siRNA NC组（183.8 ±12.6）比较,差异有统计学意义（F＝24.694,P＆0.001）；BC组和siRNA NC组DLD1细胞凋亡率分别为（1.62±0.24）%和（1.84±0.27）%,与FSTL1 siRNA组（12.32 1.96）%比较,差异有统计学意义（F＝19.687,P＆0.001）；沉默FSTL1的表达后可下调Cyclin E、E2F-1和p-Rb的表达,上调p53和p73的表达（F＝5.214、21.953、10.842、22.264、18.062,P＆0.05）；干扰FSTL1的表达后可促进细胞中Cytochrome C、bax、cleaved-PARP和cleaved-Caspase 3的表达,并抑制bcl-2的表达（F＝18.694、31.481、28.043、34.875、39.746,P＆0.01）；敲除FSTL1的表达后可导致DLD1细胞中p-ERK1/2和p-Akt表达下调（F＝35.184、15.274,P＆0.01）。结论 FSTL1与结肠癌细胞生长和凋亡密切相关。