原花青素对盲肠结扎穿孔诱导脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用

摘要

目的观察原花青素对盲肠结扎穿孔（CLP）诱导脓毒症小鼠的保护作用,探讨其作用机制。方法将36只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数表法随机分为Sham组、CLP组及治疗组。采用盲肠结扎穿孔建立脓毒症小鼠模型,Sham组仅做开腹处理,治疗组则在建模后腹腔注射原花青素（100mg/kg）。观察各组小鼠生存状态并记录72h内死亡情况。另一批小鼠于建模后24h处死,收集外周血及肺组织。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血及肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-名及IL-1β含量;苏木素-伊红（HE）染色检测肺组织病理变化;精密称量仪称取烘干前后肺组织质量并测定湿/干质量比值;Western blot法检测肺组织胞质及胞核中核因子-κB（NF-κB） p65的蛋白表达情况;ELISA法检测肺组织中NF-κB p65的DNA结合活性。结果 Sham组小鼠72 h生存率为100%,CLP组小鼠72 h生存率仅为20%,而治疗组小鼠72 h生存率为46. 7%,差异有统计学意义（P=0. 005）。建模24 h后,与CLP组比较,治疗组小鼠外周血及肺组织中炎性因子TNF-α（214. 000±16. 310比426. 300±22. 980,F=111. 300,P=0. 000;593. 300±39. 040比936. 500±55. 360,F=123. 600,P=0. 000）、IL-6 （1 020. 000±72. 150比1 741. 000±83. 710,F=148. 400,P=0. 000; 1 107. 000±68. 530比1 830. 000±99. 190, F=140. 500,P=0.000）及IL-1β（507. 200±28. 780比820. 700±47. 770, F=127. 700, P=0. 000; 154. 200±7. 769比257. 300±20. 390,F=63. 590,P=0. 000）的含量均显著降低;肺组织中肺泡间隔增宽及大量炎细胞浸润等病理改变明显减轻;肺组织湿/干质量比值显著降低（3.966±0.255比5. 116±0.261,F=16.500,P=0.000）;肺组织胞质蛋白中NF-κB p65的表达明显增加（0.547±0. 069比0.302±0.032,F=24. 950,P=0. 001）,而胞核中NF-κB p65的蛋白表达显著减少（0.622±0. 111比1.374±0. 123,F=25.640,P=0.001）;NF-κB p65的DNA结合活性也显著降低（1.948±0.155比2.884±0.188,F=41. 330,P=0. 000）。结论原花青素对CLP诱导脓毒症小鼠具有明显的保护作用,其机制可能与抑制NF-κB p65入核有关。