导入野生型p53基因对人胶质瘤细胞生长及化疗敏感性的影响

摘要

目的研究野生型p53基因对人胶质瘤细胞生长及化疗敏感性的影响.方法将载有野生型p53基因的表达质粒PC53-SN3导入U251细胞.通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测p53基因在转染细胞中的表达,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)和流式细胞仪检测p53基因对U251细胞生长抑制及凋亡的影响以及它与顺铂联合作用后的效果.结果通过RT-PCR证实了野生型p53基因在U251细胞中的表达.MTT检测发现p53基因对U251细胞的生长有明显的抑制作用,抑制率为(79.60±5.69)%.顺铂对U251细胞的抑制作用随着顺铂浓度的增加(1、2、4、8 mg/L)而增强,抑制率分别为(19.40±6.69)%、(24.41±2.68)%、(51.84±13.38)%、(66.22±5.02)%,但不如p53基因的抑制作用强.当野生型p53基因与顺铂联合作用于U251细胞时,抑制率明显增加,分别为(91.64±1.00)%、(94.98±1.67)%、(95.32±2.01)%、(95.65±1.00)%.p53基因转染所产生的U251细胞凋亡率为17.38%.顺铂引起的细胞凋亡率随着顺铂浓度的增加(1、2、4、8 mg/L)而增加,分别为5.71%、5.93%、6.27%、6.81%.当p53基因与不同浓度的顺铂(1、2、4、8 mg/L)联合作用于U251细胞时,凋亡率也明显增加,分别为23.50%、23.54%、23.89%、28.88%.结论野生型p53基因与顺铂对人胶质瘤细胞生长有协同抑制作用.