血管内皮细胞生长因子体外转染血管内皮祖细胞的研究

摘要

目的探讨脂质体介导血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因转染血管内皮祖细胞(EPC)应用于基因治疗的可行性、安全性.方法体外分离、培养、免疫组织化学及流式细胞仪鉴定EPC,转染VEGF后用免疫组织化学和ELISA检测EPC表达VEGF蛋白,噻唑蓝(MTT)检测EPC对VEGF质粒转染的敏感性.结果EPC表达CD34、CD31、KDR及CD133细胞表面标志,转染后EPC胞内表达VEGF,脂质体介导PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染、PcDNA3.1(-)/VEGF165空质粒转染、不转染任何质粒的3组EPC培养基上清中表达的VEGF分别为(352±35)ng/L、(45±5)ng/L、0 ng/L(P＜0.05),VEGF质粒转染对EPC增殖无影响.结论EPC可作为VEGF转染的靶细胞,用于基因治疗.