可溶性CD40配体联合LY294002对胃癌细胞生长的抑制作用

摘要

目的观察可溶性CD40配体（sCD40L）联合磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路特异性阻断剂LY294002对胃癌AGS细胞体外生长及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法将细胞分成对照组（仅加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液）、LY294002组（20μmol/L）、sCD40L组（2mg/L）和LY294002+sCD40L组。噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖变化;流式细胞术观察细胞周期和凋亡变化;透射电镜检测细胞形态变化;Western blot检测细胞PI3K、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）蛋白表达的变化。结果与单独使用sCD40L或LY294002比较,sCD40L与LY294002联合应用后细胞生存率显著降低,LY294002组、sCD40L组及联合用药组细胞生存率分别为（65.72±3.19）%、（70.14±2.98）%、（41.25±2.74）%（P＜0.05）。LY294002及sCD40L单独作用胃癌AGS细胞48 h后均可使细胞周期分布发生明显改变,细胞周期阻滞于G1期,两者联合作用比单独用药周期阻滞明显增强（P＜0.05）。对照组、sCD40L组、LY294002组、联合用药组细胞凋亡率分别为（4.10±0.86）%、（4.23±0.74）%、（8.97±1.23）%、（29.32±2.37）%,与对照组比较,sCD40L组细胞没有明显的凋亡,LY294002组细胞有一定的凋亡,两者联合作用后细胞凋亡明显增多（P＜0.05）。与对照组比较,sCD40L促进PI3K、p-Akt蛋白表达升高;与LY294002联合作用后,PI3K、p-Akt蛋白表达明显降低（P＜0.05）。结论阻断PI3K/Akt信号通路可显著增强sCD40L对人胃癌AGS细胞生长的抑制作用。