转化生长因子-β1对人主动脉平滑肌细胞表型转化的影响及其机制

摘要

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMC)表型转化的影响及其机制.方法 HA-VSMC分为3组培养:空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1抑制剂组;细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验检测各组细胞增殖、迁移能力,考马斯亮蓝染色检测其骨架形态;实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及Western blot检测其DNA结合抑制因子2(ID2)、平滑肌22α(SM22α)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、骨桥蛋白(OPN) mRNA及蛋白表达.结果 与空白对照组比较,TGF-β1组增殖及迁移细胞数均明显增多[吸光度值:2.438±0.038比2.157±0.080,P＜0.01;迁移细胞数:(30.667±3.786)个比(21.667±4.509)个,P＜0.05].考马斯亮蓝染色结果显示,TGF-β1组细胞多为肥胖型且呈峰谷状;而其余两组多呈细长梭形.TGF-β1组ID2、OPNmRNA及蛋白表达明显高于空白对照组[ID2 mRNA:1.363±0.080比0.980±0.104;OPN mRNA:1.528±0.092比1.100±0.106;ID2蛋白:0.566±0.067比0.273±0.039;OPN蛋白:0.548±0.031比0.289±0.042],而α-SMA、SM22α的mRNA及蛋白较空白对照组表达降低[α-SMA mRNA:0.666±0.011比0.994±0.010;SM22α mRNA:0.622±0.067比0.881±0.066;α-SMA蛋白:0.059±0.012比0.263±0.021;SM22α蛋白:0.063±0.011比0.301±0.041];TGF-β1抑制剂组较空白对照组ID2、OPN mRNA及蛋白表达降低[ID2 mRNA:0.503±0.091比0.980±0.104;OPN mRNA:0.786±0.098比1.100±0.106;ID2蛋白:0.148±0.020比0.273±0.039;OPN蛋白:0.168±0.020比0.289±0.042],α-SMA、SM22α mRNA及蛋白表达升高[α-SMA mRNA:1.217±0.026比0.994±0.010;SM22α mRNA:1.137±0.162比0.881±0.066;α-SMA蛋白:0.422±0.027比0.263±0.021;SM22α蛋白:0.488±0.068比0.301±0.041](P＜0.05).结论 TGF-β1可诱导人主动脉平滑肌细胞发生由收缩型向合成型的转化,该作用可能与TGF-β1上调了ID2表达水平有关.