miRNA-21通过TPM1参与高糖诱导的人主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖

摘要

目的 探讨miRNA 21在高糖诱导的人主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖中的作用,以及对靶基因原肌球蛋白1 (tropomyosin 1,TPM1)表达的影响.方法 体外培养人主动脉平滑肌原代细胞,利用脂质体转染miRNA-21mimic和inhibitor至细胞中,BrdU法检测高糖刺激miRNA-21过表达和缺失情况下人主动脉平滑肌细胞的增殖情况,荧光定量PCR检测转染前后高糖刺激时细胞miRNA-21和TPM1的表达情况,Western blot检测人主动脉平滑肌细胞中TPM1、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、平滑肌蛋白22α (smooth muscle 22 alpha,SM22α)的表达情况.结果 10、20、25 mmol/L D-葡萄糖刺激时人主动脉平滑肌细胞较正常对照组(0.613±0.022)显著增殖(0.725±0.026、0.913±0.024、1.513±0.082),差异有统计学意义(P＜0.01);10、20、25 mmol/L D-葡萄糖刺激时miRNA-21表达较对照组升高1.1、2.0、3.1倍(P＜0.01);正常组细胞转染miRNA-21 mimic后细胞增殖能力增强1.6倍,转染miRNA-21 inhibitor后高糖组细胞增殖能力减弱(P＜0.01);转染miRNA-21 mimic后TPM1表达减弱,SM22α表达下调,OPN表达增加(P＜0.01),转染miRNA-21 inhibitor后TPM1表达上调,SM22α表达上调,OPN表达减少(P＜0.01).结论 miRNA-21可下调细胞TPM1的表达,从而促进入主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖.