p53和p21动态调控小鼠大部分肝切除后肝再生

摘要

目的 探讨p53、p21在小鼠大部分肝切除(PH)后肝再生中的动态变化及其对肝再生的调控意义.方法 采用小鼠2/3肝切除模型,术后不同时间点采集血液和肝组织标本.采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肝切后不同时间点血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(A LB)的表达变化.采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、免疫组织化学、Westernblot检测肝切后不同时间点小鼠肝脏组织中p53和p21 mRNA、蛋白水平表达变化.采用原位缺口末端标记法(TUNEL)免疫组织化学法检测肝细胞凋亡.结果 各组小鼠均顺利完成手术,ALT、AST、ALB术后24、36 h与0h比较,差异有统计学意义(P＜0.01);ALT术后72 h、AST术后48 h与0h比较,差异有统计学意义(P＜0.05).与0h比较,肝组织增殖细胞核抗原(PCNA)指数在术后24h为(10.28±1.08)％(P＜0.01);36 h达到最高峰为(44.19±2.83)％ (P＜0.01).与0h比较,肝切后p53表达量最低点在15 h(2-△△Ct=0.17±0.02,P＜0.01),最高点在120 h(2-△△Ct=1.68±0.36,P＜0.05).P21在肝切后出现2个表达高峰分别在36 h(2-△△Ct=3.49±0.24,P＜0.01)和120 h(2-△△Ct=3.52 ±0.23,P＜0.01).p53和p21蛋白水平与mRNA变化趋势一致.肝切后120 h血管内皮细胞p53、p21蛋白免疫组化阳性率高达(98.29±1.57)％和(98.72±1.21)％.结论 小鼠2/3肝切除后,p53、p21动态变化调控肝再生过程.p53、p21有望成为多种肝病及肝叶切除术预后评估的检测指标.