溶瘤腺病毒ZD55-特异性核基质结合区结合蛋白1对雄激素非依赖前列腺癌细胞DU145增殖和侵袭的影响

摘要

目的观察携带特异性核基质结合区结合蛋白1（SATB1）基因短发卡RNA（shRNA）的溶瘤腺病毒ZD55-SATB1对雄激素非依赖前列腺癌细胞DU145增殖和侵袭的影响。方法同源重组法包装溶瘤腺病毒ZD55-SATB1;转染倍数（MOI）=10.0的病毒感染DU145细胞72 h后,反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测ZD55-SATB1对前列腺癌细胞SATB1基因的mRNA表达的影响;Western blot检测ZD55-SATB1对前列腺癌细胞SATB1蛋白表达的影响及病毒复制能力;结晶紫染色法、细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测ZD55-SATB1对细胞的增殖抑制和毒性作用;细胞侵袭试验检测细胞侵袭力改变。结果成功包装病毒ZD55-SATB1;RT-PCR和Western blot结果显示:ZD55-SATB1组SATB1表达量明显减少,与对照组比较差异有统计学意义。E1A蛋白表达水平在前列腺癌细胞DU145显著高于人正常前列腺上皮细胞PZ-HPV-7,差异有统计学意义,表明ZD55-SATB1具有肿瘤靶向性;结晶紫染色示:ZD55-SATB1组DU145有明显的细胞病效应。CCK-8结果显示:细胞感染后4 d,ZD55-SATB1组细胞存活率为（31.60±3.31）%,显著低于ZD55-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）组（61.70±2.42）%（P=0.025）和Ad-SATB1组（82.40±3.54）%（P=0.017）,差异有统计学意义。Transwell细胞侵袭实验结果显示:ZD55-SATB1组侵袭细胞数为（61.30±17.25）个,显著低于Ad-SATB1组[（170.10±25.44）个,P=0.043],ZD55-EGFP组[（295.40±23.36）个,P=0.013]和磷酸盐缓冲液（PBS）组[（490.50±33.36）个,P=0.009],与对照组比较差异有统计学意义。结论携带SATB1基因shRNA的溶瘤腺病毒ZD55-SATB1可有效沉默前列腺癌细胞DU145中SATB1基因的表达,同时有效抑制DU145细胞的增殖和侵袭。