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酰基化Ghrelin在体外拮抗巨噬细胞介导的炎症反应对胰岛β细胞功能影响的研究

     

摘要

目的 采用Transwell小室构建的小鼠胰岛细胞株MIN6和巨噬细胞株RAW264.7共培养系统,探讨酰基化Ghrelin能否保护胰岛β细胞免遭巨噬细胞介导的炎症损伤. 方法 实验分为单独RAW264.7巨噬细胞组、单独MIN6胰岛细胞组、共培养组和Ghrelin干预组.RT-PCR和Western blot 检测巨噬细胞上Toll样受体4(TLR4)和脂肪酸结合蛋白(A-FABP)的表达;ELISA检测细胞上清液IL-1β、TNF-α的浓度,以及葡萄糖刺激后MIN6细胞上清液的胰岛素浓度. 结果 (1)共培养系统中,巨噬细胞TLR4[mRNA及蛋白水平分别为(1.35±0.13),(0.93±0.03)],A-FABP[(1.99±0.10)vs(0.91±o.01)]的表达],细胞上清液IL-1β[(10.47±1.11) pg/ml]、TNF-α[(917.54±9.09) pg/ml]蛋白水平较单独RAW264.7巨噬细胞组高(P<0.05);(2)高糖刺激下,共培养系统中胰岛β细胞的胰岛素分泌水平较单独MIN6胰岛细胞组低(P<0.05);(3)与共培养组比较,酰基化Ghrelin干预后共培养,巨噬细胞TLR4表达水平和TNF-α均降低(P<0.05),且呈剂量依赖性,但胰岛β细胞的胰岛素分泌水平与共培养组比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 巨噬细胞与胰岛β细胞共培养后,炎症通路活化,炎症因子释放,胰岛β细胞的胰岛素分泌功能受损;酰基化Ghrelin可剂量依赖性削弱巨噬细胞和胰岛β细胞共培养后炎症通路的活化和炎症因子的释放,但不能完全阻止胰岛β细胞胰岛素分泌功能的降低.

著录项

  • 来源
    《中国糖尿病杂志》|2015年第1期|70-74|共5页
  • 作者单位

    410011长沙,中南大学湘雅二医院内分泌科,中南大学糖尿病中心,糖尿病免疫学教育部重点实验室;

    410011长沙,中南大学湘雅二医院内分泌科,中南大学糖尿病中心,糖尿病免疫学教育部重点实验室;

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    410011长沙,中南大学湘雅二医院内分泌科,中南大学糖尿病中心,糖尿病免疫学教育部重点实验室;

    410011长沙,中南大学湘雅二医院内分泌科,中南大学糖尿病中心,糖尿病免疫学教育部重点实验室;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    Ghrelin; 共同培养技术; 胰岛细胞; 巨噬细胞;

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