芒柄花苷通过下调Cyclin D表达抑制乳腺癌细胞生长的机制研究

摘要

目的 探究黄酮化合物芒柄花苷对乳腺癌生长的影响及其确切机制。方法 取对数生长期人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468细胞,3种细胞均随机分为对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、Cyclin D沉默组和高剂量实验组+Cyclin D沉默组。3种细胞的低、中、高剂量实验组均分别以浓度为20、40、80μmol·L^(-1)的芒柄花苷处理24 h,对照组使用等量二甲基亚砜处理。Cyclin D沉默组将3种细胞分别转染Cyclin D siRNA 24 h;高剂量实验组+Cyclin D沉默组在实验开始前24 h,3种细胞分别转染Cyclin D siRNA。实验0 h时用80μmol·L^(-1)的芒柄花苷处理24 h。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞增殖能力;用碘化丙啶单染细胞周期实验检测细胞周期进程;用BrdU掺入实验来检测细胞DNA复制活性;用蛋白质印迹法检测细胞中Cyclin D的表达。结果 在MCF-7细胞中,对照组和低、中、高剂量实验组细胞的增殖抑制率分别为(0.00±8.24)%,(7.20±16.81)%,(38.87±10.19)%和(65.60±5.39)%;这4组的G0/G1期比例分别为(33.87±0.68)%,(38.90±2.84)%,(44.63±3.45)%和(58.53±3.10)%;这4组的DNA复制比例分别为(100.00±6.23)%,(85.29±13.87)%,(56.67±10.26)%和(39.93±4.36)%;这4组的Cyclin D蛋白表达水平分别为1.00±0.14,0.84±0.19,0.66±0.13和0.43±0.05。在MCF-7细胞中,高剂量实验组、Cyclin D沉默组和高剂量实验组+Cyclin D沉默组细胞的增殖抑制率分别为(55.75±4.77)%,(22.65±10.31)%和(29.05±12.97)%。MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞上述指标的变化趋势与MCF-7细胞相同。3种细胞的上述指标,中、高剂量实验组分别与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 芒柄花苷可显著抑制人乳腺癌细胞增殖,使细胞周期阻滞于G0/G1期,抑制DNA复制活性,其机制可能与下调Cyclin D蛋白表达相关。