NKG2D介导CIK细胞对食管癌EC9706细胞杀伤作用的体外研究

摘要

目的:研究细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-induced killer cells,CIK)对食管癌EC9706细胞株的体外杀伤活性.方法:流式细胞仪检测EC9706细胞NKG2D配体的表达;体外分离健康者外周血单个核细胞,干扰素-γ、白细胞介素-2、CD3单抗诱导培养,流式细胞仪检测0、14天的细胞CD3+CD56+,NKG2D的表达,乳酸脱氢酶释放法测定培养14天的CIK细胞在效靶比10:1、20:1、30:1、40:1、50:1时对EC9706细胞的杀伤活性;效靶比30:1时,观察NKG2D单抗封闭CIK细胞表面NKG2D分子后对CIK细胞杀伤活性的影响.结果:EC9706细胞表达MICA、ULBP2,不表达MICB、ULBP1、ULBP3.0、14天细胞表面NKG2D表达率分别为(26.30±1.12)%、(67.13±1.34)%,差异有统计学意义(P<0.05);CD3+CD56+细胞分别为(0.68～0.07)%,(56.55±2.01)%,差异有统计学意义(P<0.05);效靶比10:1、20:1、30:1、40:1、50:1时CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性分别为(28.81±0.47)%、(37.78±0.22)%、(44.31±1.06)%、(47.25±0.47)%、(57.62±0.94)%;随着效靶比增高,CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性明显增强(P<0.05);效靶比30:1时NKG2D单抗封闭CIK细胞表面NKG2D分子后,CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性为(30.29±1.45)%,与阻断前(44.31±1.06)%相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:体外CIK细胞培养增殖过程中,NKG2D分子表达逐渐上调,CD3+CD56+细胞逐渐增多,CIK细胞杀伤EC9706细胞通过NKG2D发挥作用.