ELISA检测抗荚膜组织胞浆菌抗体方法的建立

摘要

目的 建立检测小鼠血清中抗荚膜组织胞浆菌抗体的ELISA方法.方法 制备荚膜组织胞浆菌(HC)抗原和结核分枝杆菌(MTB)抗原免疫小鼠,通过不同免疫次数获得不同效价的小鼠抗HC血清.以荚膜组织胞浆菌蛋白提取物(P-HTPM)为包被抗原,"方阵滴定法"确定包被抗原和抗血清的最适工作浓度,建立检测抗HC抗体ELISA法.结果 HC抗原免疫小鼠3次获得4份低效价抗血清,平均A值为0.345,免疫4次获得8份高效价血清,平均A值为0.991.ELISA方法中包被抗原和抗血清的最佳工作浓度为1 μg/孔及1∶1 000.P-HTPM和TB-PPD与各自免疫血清均呈阳性反应,A值分别为0.993±0.216和1.606±0.263,但二者之间无交叉反应.结论 本文建立的ELISA方法将成为荚膜组织胞浆菌病和结核病的一种鉴别诊断方法.