ELISA定量检测乙型脑炎病毒抗原

摘要

目的 建立双抗体夹心ELISA定量检测乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV)抗原方法,用于乙脑疫苗工序产品抗原含量检测.方法 以抗JEV多克隆抗体作为包被物,辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体作为酶标记物,四甲基联苯胺(TMB)-H_2O_2显色,建立双抗体夹心ELISA法.根据已知浓度抗原,确定定量标准曲线,检测样品中JEV抗原含量;并对该方法各项指标进行验证.结果 该方法最佳线性范围为12.5～200 U/ml;r=0.9989;定量限度为12.5 u/ml;回收率为85.0%～103.3%;变异系数为4.3%～5.5%;与甲肝疫苗原液、流感疽苗原液、Vero细胞裂解液蛋白、小牛血清、人血清清蛋白均无交叉反应.结论 该方法线性好,特异性强,灵敏度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于乙脑疫苗各工序产品的抗原定量检测.