多重耐药铜绿假单胞菌外排泵基因表达与耐药表型和耐药程度的关系

摘要

目的 建立实时荧光定量PCR法检测多重耐药铜绿假单胞菌(Pa)的外排泵基因表达量,探讨不同类型外排泵基因表达与耐药表型和耐药程度的关系.方法 收集临床分离的多重耐药Pa共80株,分析其耐药表型;用实时荧光定量PCR检测不同类型外排泵基因的表达量,用外排泵抑制剂CCCP及PAβN进行外排泵基因筛查,并比较其结果.结果 64株(80％)检出了不同类型外排泵基因,包括单独表达MexA 30株(37.5％),MexC 12株(15.0％),MexX 8株(10.0％),同时表达MexA和MexC者10株(12.5％),同时表达MexA和MexX者4株(5.0％).外排泵抑制剂筛查试验总阳性率分别为CCCP抑制法73.8％,PAβN抑制法72.5％.MexA的表达主要增强对美罗培南、三代头孢菌素、氟喹诺酮类、大环内酯类的耐药,且随表达量的增加而增强.MexC型主要增强对氨基糖苷类、氟喹诺酮类、三代头孢菌素、哌拉西林/他唑巴坦类的耐药性,且随表达量的增加而增强.MexX型外排泵的表达主要增强对氨基糖苷类、大环内酯类、氟喹诺酮类和氨曲南的耐药性.MexA和MexC型同时表达与MexA型一致,并增强了对氟喹诺酮类的耐药.MexA和MexX型同时表达与MexA型一致,并增强了对庆大霉素的耐药而降低了对氟喹诺酮类的耐药性.结论 Pa的外排泵基因的表达量与特定种类的药物耐药程度有关,外排泵基因的高表达参与并加剧了Pa的耐药性.