环介导等温扩增技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌

摘要

目的 建立环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测肺结核患者痰标本和分枝杆菌阳性培养物中的结核分枝杆菌(MTB).方法 选择临床可疑肺结核患者痰标本121份、MTB阳性分离物14份,非结核分枝杆菌(NTM)阳性分离物14种共31株,用涂片抗酸染色镜检、罗氏固体培养基培养、LAMP技术分别进行检测,用LAMP技术对人MTB标准菌株H37Rv及卡介苗(BCG)进行检测,判断LAMP检出限并评价敏感性和特异性.结果 涂片法抗酸杆菌检出率为38.02％ (46/121),培养法MTB检出率为42.15％ (51/121),LAMP法MTB检出率为49.28％ (56/121),差异无统计学意义(x2分别为3.146和1.247,P均＞0.05).对121例可疑肺结核患者痰标本进行MTB检测,以罗氏固体培养基培养结果为金标准,LAMP检测结果的敏感性为92.16％ (47/51),特异性为87.14％ (61/70),二者无显著性差异(X2=1.247,P＞0.05),且一致性强(kappa=0.78,P＜0.01).LAMP能准确分辨MTB和NTM阳性分离物,对H37Rv、BCG检测结果均为阳性；对H37Rv菌株的检出限为120 CFU/mL.结论 LAMP检测MTB敏感性和特异性高,操作简便易行、快速准确,不需要昂贵的检验设备,适于基层医院结核病诊断的推广和应用.