人可溶性补体受体1型双抗体夹心ELISA法的建立及初步应用

摘要

目的 建立定量检测人血清可溶性补体受体1型(sCR1)双抗体ELISA夹心法.方法 用鼠抗人CD35单克隆抗体(mAb)包被反应板,以兔抗人sCR1抗体(PcAb)为夹心抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG为检测抗体,纯化后的人sCR1蛋白为标准品,建立定量检测人血清sCR1双抗体夹心ELISA法,并检测50例体检健康者和32例肝硬化患者血清样本中sCR1水平.结果 建立的双抗体夹心ELISA法检测人血清sCR1的线性范围为15.6 ～ 250 ng/mL.低、高浓度批内变异系数(CV)分别为9.3％、7.1％；批间CV分别为11.2％和9.82％；回收率分别为89.5％和92.5％.50例健康人和32例肝硬化患者血清sCR1水平分别为(33.82±5.88)ng/mL和(152.99 ±9.51) ng/mL,两者比较有统计学差异(t=70.18,P＜0.001).结论 成功建立了检测人血清sCR1的双抗体夹心ELISA法,重复性和准确性较好.初步发现肝硬化患者血清sCR1水平显著升高.