干预HSF1影响MDR1的表达逆转结直肠癌HCT-8细胞株耐药的实验分析

摘要

目的 探讨热休克转录因子1(heat shock factor 1,HSF1)表达水平与MDR1、Cyclin D1、MMP-2、BCL-2的关系,以及对HCT-8/FU细胞株克隆和侵袭能力的影响.方法 采用Western blot法检测HCT-8/FU细胞株及结肠腺癌非耐药细胞株HCT-8中HSF1及MDR1的表达.设计2条针对HSF1基因的干扰RNA表达载体及阴性对照载体,分别稳定转染HCT-8/FU细胞.采用RT-PCR及Western blot法检测各组中HSF1、MDR1的mRNA及蛋白表达量,并通过克隆实验及Transwell实验检测各组细胞生长情况和侵袭能力.通过CCK-8实验检测不同药物浓度中各组细胞的增殖活性.结果 HCT-8/FU耐药细胞株中HSF1、MDR1的蛋白表达量均高于HCT-8细胞株,差异有统计学意义(P<0.01).沉默HSF1的细胞中MDR1表达水平下降,而过表达HSF1细胞株中MDR1的表达水平增高,差异有统计学意义(P<0.01).CCK-8细胞增殖实验结果显示沉默HSF1可提高耐药细胞对化疗药物的敏感性,其细胞增殖活性降低(P<0.05).与空白对照组相比,沉默HSF1后Cyclin D1、MMP-2与BCL-2表达降低,可明显抑制肿瘤细胞克隆及体外侵袭能力,过表达HSF1则可增强肿瘤细胞的克隆和体外侵袭能力,差异有统计学意义(P<0.01).结论 结直肠癌中HSF1作为转录因子可促进肿瘤细胞的克隆及侵袭,同时其高表达可启动MDR1的转录与翻译,进而促进肿瘤耐药.