异硫氰酸苯酯柱前衍生化反相高效液相色谱法同时测定18种氨基酸

摘要

建立了一种利用反相高效液相色谱同时测定18种氨基酸的方法.以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,用C18色谱柱在柱温38 ℃下采用二元梯度洗脱,于254 nm波长处检测.氨基酸质量浓度在 3.5 mg/L～55.6 mg/L时,其峰面积与内标物峰面积的比值和氨基酸的质量浓度的线性相关系数,除胱氨酸(0.962)外均大于0.99;18种氨基酸的加标回收率在96.0%～102.4%.信噪比为2时,亮氨酸最低检测限为 0.5 mg/L.应用该方法对小牛血去蛋白注射液中的游离氨基酸含量进行了测定,取得了满意的结果.