三维膜对小鼠诱导多能干细胞体外培养效果的影响

摘要

目的通过将小鼠诱导多能干细胞（miPSC）接种到由3-羟基丁酸-3-羟基己酸共聚酯（PHBHHx）材料制作的三维膜上,研究PHBHHx三维膜对干细胞存活、增殖及分化的影响,寻找适合制作心肌补片的生物材料。方法复苏、培养和鉴定miPSC后,将miPSC分为实验组和对照组,实验组将miPSC接种到PHBHHx材料制成的三维膜上培养,对照组将miPSC接种到传统的细胞培养皿中培养。将其中一部分miPSC加入干细胞培养基,72 h后采用CCK-8法测定细胞活力,观察细胞的增殖情况;将另一部分miPSC加入分化培养基诱导分化,15 d后采用免疫荧光法测定心肌肌钙蛋白T（cTnT）,采用流式细胞术测定cTnT的表达量,检测细胞的分化情况。结果 CCK-8法细胞活力测定显示,实验组吸光度值为0.836±0.038,对照组吸光度值为0.312±0.004,差异有统计学意义（P＜0.05）;扫描电镜显示,miPSC在PHBHHx三维膜上黏附生长,细胞彤态正常。免疫荧光显示,两组miPSC的cTnT表达均为阳性;cTnT表达量实验组为（60.32±1.76）%,埘照组为（47.54±1.46）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 miPSC可以在PHBHHx材料制作的三维膜上存活、增殖和分化;与传统的细胞培养皿相比,PHBHHx制作的三维膜更能促进miPSC的增殖和分化。