根癌土壤杆菌介导转化诸葛菜子叶获得转基因植株

摘要

采用诸葛菜子叶为材料,在MS+BA3mg/L+NAA0.2mg/L培养基上诱导芽的再生,1/2MS+IBA0.03mg/L上诱导生根,获得完整再生植株,建立了诸葛菜组织培养高频再生系统,其再生率可达100％。采用土壤杆菌介导转化诸葛菜子叶,在附加一定量的氨苄青霉素、头孢霉素和卡那霉素的相应培养基上进行筛选,进而培养出再生成苗。获得完整植株,经GUS和NPTⅡ酶活测定,以及Southern blot分析,证实为转基因植株。转化子叶的芽再生率为51％,获得完整转基因植株的转化率为5.53％。在国内外首次建立了以根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)为载体,诸葛菜子叶为受体的遗传操作系统。