嗜乙酰乙酸棒杆菌Corynebacterium acetoacidophilum-△ldh缺氧条件下代谢葡萄糖途径的变化

摘要

缺氧条件下嗜乙酰乙酸棒杆菌Corynebacterium acetoacidophilum ATCC13870生长停滞,却能够代谢葡萄糖产生以乳酸和琥珀酸为主的有机酸.采用以sacB基因为反向筛选标记的同源重组染色体基因敲除系统,敲除嗜乙酰乙酸棒杆菌的乳酸脱氢酶基因,得到的0ldh菌株CCTCC NO.M20122041在缺氧条件下不产乳酸,葡萄糖消耗速率降低了29.3％,产琥珀酸和乙酸浓度分别提高45.6％和182％;NADH/NAD+值小于l(约0.7);磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶和乙酸激酶的比酶活分别提高84％和12倍.说明嗜乙酰乙酸棒杆菌中乳酸合成途径的阻断驱使了琥珀酸和乙酸代谢途径加强,推测加强NADH供给和阻断乙酸产生支路可能是提高C.acetoacidophilum菌株产琥珀酸产量的有效途径.