重组ETEC k88ac-LT_B干酪乳杆菌在人工消化液中的生存性能

摘要

探讨重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)在人工消化液中的存活能力。将K88ac-LTB基因从表达载体pQE-30克隆到L.casei细胞表面表达载体pLA中,构建了重组表达载体pLA-K88ac-LTB,并将其电转化至L.casei中,在MRS培养基中培养后,Western blotting检测,有约71.2kD蛋白得到了表达,表达蛋白的大小与理论值相符且可被抗血清所识别,间接免疫荧光实验及流式细胞结果表明,多聚谷氨酸合成酶A蛋白(pgsA)能够将融合蛋白成功地展示在菌体表面。将重组菌接种于人工模拟的胃肠液中,通过平板计数观察其存活能力。结果表明,重组干酪乳杆菌在人工消化液中均具有良好的存活性能,符合益生菌的基本特征,为实验动物模型的建立奠定了基础。