喷施菌剂后葡萄叶片真菌多样性的PCR-DGGE分析

摘要

为探讨葡萄叶片喷施砖红微杆菌Y24菌剂和解淀粉芽胞杆菌N22菌剂后其表面真菌多样性的变化,本研究采用PCR-DGGE技术,以样品的基因组DNA为模板,扩增出大小约为400 bp的真菌18S rDNA高变区,DGGE电泳后进行图谱分析,并对标记条带进行切胶、回收、克隆和测序以研究真菌多样性相关的特征数和菌群组成。DGGE图谱分析表明,喷施砖红微杆菌Y24菌剂的叶片样品的丰富度指数S最高,香农-维纳指数H′最大,喷施解淀粉芽胞杆菌N22菌剂后的这两个指标与对照相比无明显变化。对DGGE图谱上标记出的25个条带进行测序比对,发现葡萄叶片上的真菌主要为非可培养链格孢(Uncultured Alternaria alternata)、枯叶格孢腔菌Pleospora herbarum、近平滑假丝酵母Candida parapsilosis和非可培养真核生物等。喷施砖红微杆菌Y24菌剂的特有的真菌类群包括非可培养真菌、隐球菌属Cryptococcussp.和非可培养真核生物。葡萄叶片喷施砖红微杆菌Y24菌剂后附生真菌种类变得更丰富,喷施解淀粉芽胞杆菌N22菌剂后与对照无显著差别。