人EPO cDNA基因在CHO细胞中的稳定表达

摘要

目的：建立稳定表达人红细胞生成素（ＥＰＯ）的工程细胞株。方法：用ＤＮＡ磷酸钙共转染法，将人ＥＰＯ ｃＤＮＡ的表达质粒ｐＣＤＢ与樗质粒ｐＳＶ－ｄｈｆｒ共转染到ＣＨＯ－ｄｈｆｒ－细胞中。用ＥＬＩＳＡ法检测到７０个克隆的细胞培养上清，筛选出５０个克隆细胞系。结果：经ＭＴＸ加压扩增，获得４系高效表达ＥＰＯ的细胞系（Ｂ４、Ｃ３、Ｆ１０、Ｇ７），表达量为２．２～１０μｇ／（１０＾６ｃｅｌｌ·２４ｈ），ＥＰＯ的